Skip to main content

Identifikasi bakteri cocus gram positif



Identifikasi organisme didasarkan pada karakteristik selular, kultur dan biokimia . Semua jenis Staphylococcus adalah cocci Gram positif.   Pada nutrient agar mereka cenderung berwarna putih, koloni bulat, seluruh, cembung. Pada media Agar darah Staphylococcus aureus dapat menunjukkan hemolisis dari agar-agar di daerah sekitar koloni.
Tes biokimia tambahan yang berguna dalam memisahkan Staphylococcus spesies antara lain katalase, coagulase, pertumbuhan dan fermentasi garam manitol, dan resistensi atau kerentanan terhadap antibiotik novobiocin.
Tes   katalase menentukan apakah organisme menghasilkan enzim katalase yang mengurai hidrogen peroksida  menjadi air dan oksigen.  2 H 2 O 2 __catalase__ > 2 H 2 O + O 2
Enzim ini memungkinkan organisme untuk terbebas dari metabolit berbahaya hasil respirasi aerobik yang juga dapat dihasilkan oleh organisme   aerobik dan anaerobik facultatively. Ada enzim lain yang dihasilkan beberapa organisme untuk menangani metabolit   endproducts yang beracun  sehingga tidak semua aerob atau anaerob fakultatif menghasilkan katalase.
Organisme patogen memiliki mekanisme untuk membantu mereka mengatasi mekanisme pertahanan tuan rumah. Satu contoh mekanisme perlindungan yang melibatkan lapisan sel-sel bakteri dalam tubuh host, seperti fibrin, untuk mengelabui sistem kekebalan tubuh host. Pelapisan dari zat tubuh alami ini tidak akan  memicu respon imun. Enzim Coagulase  menyebabkan pembentukan fibrin yang melindungi sel-sel bakteri.dari sistem immunitas host.
Beberapa organisme tidak dapat mentoleransi tekanan osmotik yang tinggi. Media yang mengandung konsentrasi garam lebih tinggi dari normal   dapat menghambat pertumbuhan Organisme yang non-toleran garam  Media agar garam manitol (manitol salt agar) mengandung konsentrasi garam yang tinggi sehingga hanya organisme yang   toleran garam yang akan tumbuh di atasnya. Selain itu, manitol garam agar berisi gula manitol. Beberapa organisme dapat menggunakan manitol sebagai sumber makanan dan akan menghasilkan asam endproducts dari metabolisme ini. Karena proses ini tidak terlihat, maka indikator ditambahkan ke media untuk mendeteksi perubahan   pH. Fenol merah adalah indikator yang digunakan dalam manitol garam agar. Berwarna merah pada pH netral tapi berubah menjadi kuning jika kondisi di media menjadi asam.
Kerentanan antibiotik adalah tes lain yang dapat digunakan untuk mengidentifikasi organisme. Sebuah kertas filter cakram yang diresapi dengan antibiotik, dalam hal ini novobiocin. Ketika disk
ditempatkan pada   agar, antibiotik berdifusi melalui agar. Organisme yang rentan terhadap antibiotik tidak akan mampu tumbuh pada media yang mengandung antibiotik. Sebuah zona inhibisi (tidak ada pertumbuhan) akan terlihat di sekitar disk. Ukuran zona hambatan menunjukkan penolakan atau kerentanan organisme terhadap antibiotik.


Prosedur Uji Katalase
Interpretasi: gelembung menggelegak menunjukkan hasil tes positif (+)   dan kurang atau tidak menggelegak menunjukkan tes negatif (-)  

Uji Coagulase Plasma
Tujuan Tes ini untuk mengetahui apakah organisme mempunyai enzim koagulase yang dapat menggumpalkan plasma  . Tes ini digunakan untuk membedakan spesies dari   genus Staphylococcus. Terbentuknya clot fibrin menunjukkan reaksi positif  . Adanya clotting dalam tabung   diamati sesudah 4 dan 24 jam , Sesudah itu sistem profibrinolysin-fibrinolysin  akan diaktivasi dan menyebabkan lisis clot. . 
Manitol Salt Agar
Interpretasi: Dua karakteristik yang berbeda dari organisme ditentukan dengan agar. Yang pertama adalah kemampuan organisme untuk menoleransi lingkungan garam yang tinggi. Bukti pertumbuhan pada area miring menunjukkan organisme dapat tumbuh di lingkungan garam yang tinggi.
Organisme yang dapat memfermentasi manitol gula asam menghasilkan produk akhir yang dapat
merubah pH indikator merah di media menjadi kuning. Setiap kuning di media dianggap sebagai tes positif untuk fermentasi manitol. Pada media ini dimungkinkan adanya organisme yang tumbuh
pada media namun tidak memfermentasi manitol.

strepto
Semua spesies Streptococcus cocci Gram positif. Beberapa hanya akan tumbuh pada media agar diperkaya  , misalnya 5% agar darah domba.
Pada agar darah domba koloni yang biasanya abu-abu, punctiform, cembung, dan seluruh. Menampilkan berbagai jenis alfa, beta atau gamma hemolisis.
Tes biokimia penting termasuk katalase, kerentanan bacitracin, kerentanan optochin  , pertumbuhan dalam kaldu garam tinggi, pola hemolisis dilihat dengan uji CAMP, dan kemampuan untuk menghidrolisis esculin.
Tes kerentanan bacitracin dan tes kerentanan optochin serupa dengan uji kerentanan novobiocin yang digunakan untuk identifikasi spesies Staphylococcus. Kertas filter disc diresapi dengan antibiotika yang sesuai ditempatkan pada permukaan agar. Zat tersebut berdifusi melalui agar. Organisme yang rentan terhadap antibiotika akan tidak tumbuh pada agar yang mengandung bahan antibiotik. Ukuran zona penghambatan pertumbuhan organisme menentukan kerentanan terhadap bahan kimia.
Faktor CAMP diffusable  adalah protein yang dihasilkan oleh spesies tertentu Streptococcus. Faktor ini akan bereaksi dengan menghasilkan toksin beta oleh Staphylococcus aureus akan dengan cepat melisiskan sel darah merah domba. Bila Streptococcus memproduksi CAMP   akan tumbuh dekat racun beta yang pasti diproduksi oleh strain Staphylococcus aureus dan menghasilkan sinergi membentuk pola hemolitik khas
Beberapa organisme dapat mentoleransi konsentrasi garam NaCl 6,5%. Dan akan  tumbuh dalam kaldu garam tinggi.
Media Esculin empedu agar berisi empedu yang menghambat pertumbuhan dari banyak organisme. Beberapa organisme dapat menghidrolisis esculin menjadi esculetin dan dekstrosa. Esculetin akan bereaksi dengan besi sitrat di media untuk menghasilkan produk berwatna cokelat hitam.  

Bacitracin Kerentanan
1. Membagi plate agar darah domba menjadi empat kuadran.
2. Label sebuah kuadran dengan nama organisme yang akan diuji.
3. Menggunakan loop steril secara aseptik untuk mentransfer organisme tes ke plate dan buat parit
    antara tiap kuadran  .
4. Mentransfer secara aseptik   bacitracin disc (A disc) ke tengah kuadran.
    gunakan penjepit steril untuk mengatur posisi disc. Tekan lembut   disc ke permukaan agar-agar
    tetapi tidak membenamkan disc dalam agar.
5. Tutup plate dan masukkan dalam inkubator selama minimal 18 jam.
6. Memeriksa piring untuk zona inhibisi pertumbuhan di sekitar cakram. Bila sudah selesai,  buang
    piring dalam wadah Biohazard.

Interpretasi: Setiap zona inhibisi pertumbuhan dianggap positif (+) untuk tes ini.. Tes ini harus dilakukan hanya pada organisme yang menampilkan hemolisis beta.

Kerentanan Optochin 
1. Membagi plate agar darah domba menjadi empat kuadran.
2. Label sebuah kuadran dengan nama organisme yang akan diuji.
3. Menggunakan loop steril secara aseptik untuk mentransfer organisme tes ke plate dan buat parit di
    antara kuadran.  .
4. Mentransfer optochin disc (P disc) secara aseptik ke tengah kuadran.. Gunakan penjepit steril
    untuk mengatur posisi disc. Tekan lembut   disc ke permukaan agar-agar tetapi tidak
    membenamkan disc dalam agar.
5. Tutup plare dan masukkan ke  dalam inkubator selama minimal 18 jam.
6. Memeriksa plate untuk zona inhibisi pertumbuhan di sekitar cakram. Menggunakan metrik
    penggaris, mengukur diameter zona penghambatan dan mencatat pengukuran dalam milimeter
    (mm). Apabila selesai  buang piring di wadah Biohazard  

Interpretasi: Sebuah zona hambatan pertumbuhan 15-30 mm dianggap uji.positif (+)   Zona ukuran kurang dari 15 mm dianggap negatif (-) untuk tes ini. Pengujian ini harus dilakukan hanya pada organisme yang menampilkan alfa hemolisis.

Bacitracin Kerentanan
1. Membagi plate agar darah domba menjadi empat kuadran.
2. Label sebuah kuadran dengan nama organisme yang akan diuji.
3. Menggunakan loop steril secara aseptik untuk mentransfer organisme tes ke plate dan buat parit
    antara tiap kuadran  .
4. Mentransfer secara aseptik   bacitracin disc (A disc) ke tengah kuadran.
    gunakan penjepit steril untuk mengatur posisi disc. Tekan lembut   disc ke permukaan agar-agar
    tetapi tidak membenamkan disc dalam agar.
5. Tutup plate dan masukkan dalam inkubator selama minimal 18 jam.
6. Memeriksa piring untuk zona inhibisi pertumbuhan di sekitar cakram. Bila sudah selesai,  buang
    piring dalam wadah Biohazard.

Interpretasi: Setiap zona inhibisi pertumbuhan dianggap positif (+) untuk tes ini.. Tes ini harus dilakukan hanya pada organisme yang menampilkan hemolisis beta.

Kerentanan Optochin 
1. Membagi plate agar darah domba menjadi empat kuadran.
2. Label sebuah kuadran dengan nama organisme yang akan diuji.
3. Menggunakan loop steril secara aseptik untuk mentransfer organisme tes ke plate dan buat parit di
    antara kuadran.  .
4. Mentransfer optochin disc (P disc) secara aseptik ke tengah kuadran.. Gunakan penjepit steril
    untuk mengatur posisi disc. Tekan lembut   disc ke permukaan agar-agar tetapi tidak
    membenamkan disc dalam agar.
5. Tutup plare dan masukkan ke  dalam inkubator selama minimal 18 jam.
6. Memeriksa plate untuk zona inhibisi pertumbuhan di sekitar cakram. Menggunakan metrik
    penggaris, mengukur diameter zona penghambatan dan mencatat pengukuran dalam milimeter
    (mm). Apabila selesai  buang piring di wadah Biohazard  

Interpretasi: Sebuah zona hambatan pertumbuhan 15-30 mm dianggap uji.positif (+)   Zona ukuran kurang dari 15 mm dianggap negatif (-) untuk tes ini. Pengujian ini harus dilakukan hanya pada organisme yang menampilkan alfa hemolisis. 


CAMP Test
Tes CAMP untuk identifikasi  b-hemolitik Streptococcus algalactie (group B)

   " fenomena litik” antara Staphylococcus aureus dan Streptococcus agalactiae (kelompok B), menjadi dasar bagi tes CAMP,   Koloni Streptococcus   agalactie dikelilingi oleh zona hemolisis total ketika mereka tumbuh di dekat koloni Staphylococcus b-hemolitik. Adapun Streptococcus pyogenes (non-group B) gagal menunjukkan peningkatan hemolisis saat   tumbuh di dekat koloni Staphylococcus b-hemolitik  

Comments

Popular posts from this blog

Penyebab Bau yang Tidak Sedap Pada Kucing

Dokter-hewan.net - Kucing adalah hewan yang sangat mencintai kebersihan. Mereka akan melakukan selfgrooming jika merasa dirinya tidak dalam keadaan bersih. Namun, kadangkala pemilik hewan mengeluhkan bau yang tidak sedap dari hewan peliharaan mereka. Apa dan kenapa hewan mereka berbau tidak sedap? Berikut adalah sumber bau yang tidak sedap pada kucing kesayangan anda.  Bau Mulut Kucing sehat tidak memiliki bau mulut. Penyebab paling umum bau mulut adalah dental disease (gangguan pada pergigian). Plag dan karang gigi adalah kasus paling sering yang menyebabkan dental disease. Plag dan karang gigi yang menempel di gigi dan gusi akan menyebabkan terjadinya inflamasi (peradangan) sehingga akan menimbulkan bau mulut yang tidak sehat. Kebersihkan gigi juga sangat menentukan ada atau tidaknya bau mulut. Misalnya bahan makanan yang tersangkut dalam waktu lama di gigi akan mengeluarkan bau yang tidak sedap juga. Selain itu, trauma di jaringan mulut dan tumor pada mulut juga men

Kenali anak kucing yang tertinggal dalam kandungan induk

Dokter-hewan.net  - Pada keadaan normal, kucing bunting selama 64-67 hari. Dan kelahiran merupakan puncak dari proses kebuntingan. Kucing merupakan makhluk yang mandiri dimana tidak memerlukan bantuan ketika melahirkan. Namun, pada keadaan tertentu mungkin saja dijumpai kucing yang mengalami kesulitan melahirkan dan berpotensi mengancam jiwa induk dan calon anak yang akan dilahirkan. Penyebabnya dapat berasal dari induk maupun anaknya sendiri. Terkadang pemilik akan membiarkan kucingnya melahirkan dan seringkali dibiarkan hingga esok dan keesokkan harinya. Hal Ini tidak menjadi masalah ketika benar semua anak yang ada dalam kandungan induk telah keluar semua. Tapi pastikan induk memiliki akses ke makanan dan air minum tanpa risiko anak-anak kucing menjadi terjebak atau tenggelam.  Lalu, apa yang terjadi jika ada yang masih tertinggal? Hal ini sering dicurigai pemilik ketika melihat kucingnya yang baru melahirkan, dengan jeda waktu yang cukup, dan perutnya masih terlihat

Bolehkah Memberi Telur pada Kucing ?

Dokter-hewan.net – Telur merupakan salah satu makanan yang bergizi, bervitamin, dan berprotein tinggi bagi tubuh. Di dalam telur, khususnya telur ayam, mengandung protein, lemak, karbohidrat, kalsium, fosfor, zat besi, vitamin A, B1 dan C. Nilai kandungan yang terdapat pada telur tentu sangat bagus untuk kucing terlebih jika dimakan dalam keadaan mentah. Pemberian telur secara rutin akan membuat kucing menjadi gemuk karena tingginya kandungan lemak (11,5 gr) dan protein (12,8 gr), namun jangan memberi makan kucing dengan telur semata, karena telur bukanlah makanan pokok kucing. Pemberian telur pada kucing juga disarankan hanya memberi kuning telur saja, tanpa putih telur dan dalam kondisi mentah. Apakah kucing akan suka memakan telur mentah ? Pada dasarnya, kucing adalah hewan pemakan daging dan sejenisnya dalam keadaan mentah, dan manusialah yang merubah pola makan kucing dengan memberi makanan matang atau makanan instan. Lantas, bagaimana dengan pemberian putih telur pada kucing ?